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贝博® BBcellProbe® MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator线粒体超氧化物染色/检测试剂盒是利用贝博® BBcellProbe® M系列探针进行线粒体超氧化物特异性染色的试剂盒。本试剂盒中的MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator线粒体超氧化物染色探针为红色荧光标记的线粒体探针，具有510/580 nm的最大激发/发射波长。
贝博® MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator线粒体超氧化物染色探针是一种细胞渗透型的对活细胞中的线粒体体进行选择性染色的一类新型荧光染料，该探针可以选择性标记线粒体，包含标记线粒体的弱巯基反应性的氯甲基官能团。只需简单孵育细胞，即可穿过细胞膜并直接聚集在活性线粒体上。一旦进入线粒体后，快速被超氧化物氧化，并产生红色荧光。MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator线粒体超氧化物染色探针只可被超氧化物氧化，而不被其他活性氧类(ROS)和活性氮类(RNS)氧化。氧化产物结合核酸后，可产生大量红色荧光。
贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞分析试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种细胞检测试剂盒产品。
2. 探针液A为DMSO溶液，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3. 可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
2. 激光共聚焦
3. 流式
4. 酶标仪
5. 荧光光度计
2. 贴壁细胞
2. 激光共聚焦
2. 离心机
3. 移液器
4. 冰箱
5. 冰盒
2. 吸头
3. 一次性手套4. 铝箔
1. MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator染色液为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
2. 使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
3. 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
4. 标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化，确定最佳条件。以下方法仅供参考。
5. 染色后立即进行分析。
根据样本数量，用染料稀释液将MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator染料10倍稀释，再用HBSS缓冲液或者相应的培养基10-50倍稀释，配制成染色工作液。
2. 细胞染色
2.1 对于贴壁细胞
1）培养皿/培养板准备细胞样本。
2）待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下避光孵育10分钟～30分钟（具体孵育时间需根据细胞类型而定，需预实验优化）。
3）利用新鲜培养基替换上述染色液。
4）荧光显微镜（含合适滤片）或激光共聚焦显微镜、荧光酶标仪下检测。最大激发/发射波长为510 / 580 nm。
2.2 对于悬浮细胞
1）离心，吸除上清。
2）利用37℃预热的探针工作液重悬细胞，于生长状态下避光孵育10分钟～30分钟（具体时间需根据细胞类型而定，需预实验优化）。
3）离心，吸除染色液，加入新鲜培养液重悬细胞。
4）置于荧光镜下拍照分析。或流式细胞仪、荧光酶标仪检测。最大激发/发射波长为510 / 580 nm。
Chenodeoxycholic acid suppresses AML progression through promoting lipid peroxidation via ROS/p38 MAPK/DGAT1 pathway and inhibiting M2 macrophage polarization
Redox Biology 2022 （IF=10.878）
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